巴氏杆菌病(禽霍乱)(二)

【症状】 潜伏期2~9天。按病程有最急性、急性、慢性之分,各型的主要症状如下:1.最急性型 本型经过急骤,常为突然发病,几乎见不到任何症状,迅速死在鸽窝或鸽舍(笼)内。死前多有乱跳、拍翼等挣扎动作。这样的病例通常在肥壮、高产的鸽群中和流行本病前出现。

  2.急性型 本型病例为大多数,病鸽表现体温升高,精神委顿,羽毛松乱,头低眼闭,翅膀下垂,食欲减少或废绝,渴欲增加,离群呆立,不愿走动。眼结膜发炎,鼻瘤灰白,喙、眼、鼻瘤等处潮湿且污脏,多数病鸽伴有下痢,粪便稀烂、恶臭,呈铜绿色或棕绿色、黄绿色。嗦囊积液,倒提时口流带泡沫的黏液,最后衰竭、昏迷而死。病程从不足1天至3天。

  3.慢性型 急性型不死的病例可转为慢性型,以流行后期较多见。病鸽可出现呼吸道慢性炎症、慢性胃肠炎、关节炎等,分别呈现鼻液增加,有呼吸声或呼吸困难的症状;持续腹泻、消瘦、贫血;肢体关节肿大,垂翅,跛行或脚麻痹。病程较长,可达1个月以上。

  【病变】 1.最急性型 外表常无明显病变,或偶见心外膜有疏落的针尖大出血点。

 2.急性型 剖检可见鼻腔内积有黏液,肌肉、血液呈暗褐色,皮下组织、心冠脂肪、心外膜、腹膜、腹腔脂肪、肠系膜、浆膜、生殖器官等处有弥漫性针尖大出血点。十二指肠严重出血,肠内有血性内容物或血块。心包膜增厚,心包液增多,呈淡黄色、不透明或絮状。胸腔和腹腔尤其是气囊和肠浆膜上,常有纤维素性或干酪样灰白色渗出物,肠黏膜上覆盖有一层黄色纤维素。肝的表面弥漫散布针尖大、黄白色坏死点及心外膜、心冠脂肪有针尖大出血点是本病的特征性病变。

  3.慢性型 慢性呼吸道炎的可见有鼻液,鼻勃膜潮红,喉头内有炎症分泌物;慢性胃肠炎的,肠黏膜潮红、肿胀甚至出血;关节炎的可发现关节肿大、变形,关节囊增厚,内有浑浊液体或干酪样物。

  【诊断】 对本病的急性型典型的症状与病变,不难做出诊断,其他两型须结合病原检查。

  1:微生物学检查 无菌采取疑似巴氏杆菌病鸽的心、肝、脾、肾等有病变的内脏器官做触片或涂片,待自然于燥后用火焰固定,美蓝染色或姬姆萨染色镜检,如见两极染色卵圆形的小杆菌;或革兰氏染色镜检,见有革兰氏阴性、大小一致、卵圆形的小杆菌,可确诊。对于慢性病例或腐败材料不易发现典型菌,须进行病原的分离培养。

  病原的分离培养:将被检病料接种于绵羊鲜血琼脂培养基或血清琼脂培养基,于37℃温箱作用24小时,再取其中细小、半透明、圆整、淡灰色、光滑的菌落接种于鲜血斜面培养基,供涂片镜检、生化反应、动物接种、血清学检验用。

  2.动物接种 无菌采取疑似巴氏杆菌病鸽的心或肝脏、脾脏磨细,用灭菌生理盐水作1:5~10倍稀释,鹅或鸭皮下或肌内注射0.5~1.0毫升,或静脉注射0.5毫升,或滴鼻0.1~0.2 毫升,接种后于24~48小时死亡,剖检见有典型禽巴氏杆菌病病理变化即可确诊。小白鼠皮下或腹部注射0.2~0.5毫升,于24~48小时死亡,剖检内脏器官呈败血症病理变化。

3.抗原型鉴定

  (1)荚膜(K)抗原型鉴定 将被鉴定菌株接种于马丁氏琼脂斜面培养基,于37℃温箱作用24小时,用2~3毫升灭菌生理盐水洗下,并收集于小试管中,置于56℃水浴中30分钟,促进荚膜物质由菌体解脱下来,然后经6000~8000转/分离心30~60分钟,上清液即为所制备的荚膜抗原。取被检菌株荚膜抗原约0.3 毫升,加入经福尔马林固定的0.2 毫升洗净的绵羊红细胞,充分混合后置37℃温箱或水浴箱中作用1~2小时。然后经3000转/分离心30分钟,弃上清液,沉淀红细胞,再用约10毫升生理盐水洗1次红细胞,除去游离的未被红细胞吸附的荚膜抗原。离心收集的致敏红细胞,加入20毫升生理盐水,配制成1%致敏红细胞悬液。各取1%致敏红细胞悬液0.5毫升,分别加入1,10倍稀释的各型抗血清(A,B,D,E)0.5毫升于试管内,摇动试管,使之混合均匀,放置于室温中2小时或37℃温箱作用1小时后观察。阳性者红细胞呈凝集现象,阴性者红细胞集中于试管底部。判定结果的方法与一般红细胞凝集反应相同,通常以++号为标准。

  (2)菌体(O)抗原型鉴定 将被鉴定的菌株接种于马丁氏琼脂斜面,370C温箱作用24小时,每个斜面加入1毫升含8.5%氯化钠。用。.02摩尔/升的磷酸盐缓冲液洗下菌苔,收集于试管中,置100℃水浴箱内1小时,然后经6000~8000转/分离心30分钟,弃上清液,将沉淀物加入等量的缓冲液,并加入福尔马林防腐,作为被检。抗原。用8.5%氯化钠盐水配制的0.9%琼脂糖或琼脂浇人平板或玻璃板上,厚度为3~3.5毫米。凝固后用打孔器打孔,孔径一般为4毫米,孔距为6毫米,中心孔加入被检抗原,周围孔加入标准血清,于37℃温箱作用24一48小时。阳性者抗原孔与抗体孔之间出现白色沉淀带。

  4.血清学诊断 血清学诊断的目的,在于应用血清学的凝集方法对禽群进行普查诊断。用标准A,B,D,E4f菌株,或当地分离的菌株按上述介绍方法制备成1%致敏绵羊红细胞作为诊断抗原。

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