(2)鸡胚接种 用4~6枚11日龄SPF鸡胚,或4~6枚11日龄未经禽流感免疫鸡群的鸡胚，每胚绒尿腔接种上述病毒分离材料o.2毫升。接种18小时后每天照蛋4次，连续4天。通常于接种后24~48小时死亡，18小时内死亡鸡胚废弃，18小时后死亡鸡胚放置于4℃冰箱，气室向上，冷却4~12小时。用无菌手续收获绒尿液，并做无菌检查。将清朗、无菌生长和鸡胚病变典型的绒尿液放置低温冰箱冻结保存供进一步鉴定。
2.病毒鉴定
(1)血凝试验 在微量凝集板上，从第一孔起，在若干孔内，用定量针头每孔加入0.025毫升生理盐水。用定量针头吸取0.025毫升等量被检的鸡胚绒尿液加入第一孔，依次做倍量稀释，至最后一个量孔弃去余液。再用定量针头每孔加入0.025毫升1%鸡红细胞悬液，并用生理盐水代替被检鸡胚绒尿液的红细胞对照孔，立即在微量振荡器上混匀，置室温下30分钟左右判定结果。凡能使鸡红细胞完全凝集的被检病毒液最高稀释倍数，称为1个血凝单位。
(2)血凝抑制试验 在微量凝集板上，根据标准HA亚型抗血清的种类和效价数排，均从第一孔起，用定量针头在每孔加入0.025毫升生理盐水。在第一孔中分别加入已知抗血清0.025毫升，并依次做倍量稀释至最后一孔弃去余液。每孔加入含有4个凝集单位0.025毫升被检病毒液。微量板在微量振荡器上混匀，置37℃温箱中作用30分钟后，用定量针头每孔加入0.025毫升1%鸡红细胞悬液，并设被检病毒液和鸡红细胞对照孔，在微量振荡器上混匀，置室温中30分钟左右判定结果。如被某个HA 亚型抗血清所抑制，即可将被检病毒液定为该亚型。
(3)致病性检查 取1：10稀释的尿囊液o.2毫升，静脉接种于8只4~8周龄的易感鸡。隔离饲养，10天内死亡6只或6只以上，可确定为高致病力毒株。如死亡在5只或5只以下，则需根据亚型测定结果，有无形成CPE或蚀斑能力，甚至分析其HA多肤氨基酸序列后，方可确定是高致病性、低致病性或非致病性毒株。
3.血清学诊断
(1)琼脂扩散试验 用于对禽流感病毒的检查。所有AIV亚型均具有型特异性共同抗原，该种抗原的保守性很强，基本不产生变异。
(2)血凝和血凝抑制试验 该方法可证实流感病毒的血凝活性及排除新城疫病毒。因此试验可以分别确定HA，NA亚型。
(3)中和试验 以中和试验来鉴定或滴定流感病毒时，常用鸡胚或组织培养细胞。
(4)免疫荧光技术 最早用于鉴定和定位流感病毒感染细胞中特异性抗原，主要是NP或MP抗原。用NP 抗原的荧光抗体染色主要出现核内荧光；用MP抗原的荧光抗体染色主要出现胞质荧光。
(5)ELISA技术 ELISA具有较高的敏感性,既可以检测抗体,也可以检测抗原，尤其适合于大批样品的血清学调查，可以标准化，而且结果易于分析。用于流感的控制、扑灭、检疫。
【鉴别诊断】 本病虽与败血霉形体病、霉菌性肺炎、念珠菌病、鸽痘、毛滴虫病、气管比翼线虫病及维生素A 缺乏症等都有呼吸道刺激症状，但本病在头、颈、胸部有水肿，胸肌、胸骨内侧、两胃交界处的黏膜有出血病变，而上述诸病没有，故不难鉴别。
【防制】 目前对本病既无药物可治，也无确实有效的疫苗。
故若发生疫情时，应将病鸽全部淘汰，立即严密封锁场地，并进行彻底的消毒。预防中最重要的一点，是不从有本病疫情的场甚至地区引进新鸽。附近的禽场如有本病发生，应立即做好本场的严密封锁、消毒工作，以免此病累及本场。
目前，全国各地均使用家禽用禽流感疫苗预防鸽的禽流感，重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型)是预防禽流感使用最广泛的一种疫苗，H5~H9二价灭活疫苗和禽流感一新城疫重组二联活疫苗在有些地方也推荐使用，在鸽禽流感预防上发挥了重要的作用。
种鸽接种重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型)在4周龄(28 日龄)进行第一次免疫，。.3毫升/羽，颈部皮下注射；8 周龄(56日龄)进行第二次免疫，0.5毫升/羽，肌内注射；在种鸽上笼的25~26周龄(175~182日龄)进行第三次免疫，0.5毫升/羽，肌内注射；以后每半年免疫1次，0.5毫升/羽，肌内注射。如种鸽免疫效果确实，上市乳鸽的饲养期在1个月之内的，则不进行免疫接种；如种鸽未免疫，留种的幼鸽最好在7~10日龄进行第一次免疫，0.3 毫升/羽，颈部皮下注射。饲养期超过1个月的鸽子，在30日龄左右免疫1次，0.5毫升/羽，肌内注射。
禽流感一新城疫重组二联活疫苗适用于除鸭之外的家禽(包括鸽、鹤鹑、山鸡等)，以预防H5 亚型禽流感和新城疫疫病，起到”一针两防”的效果。7~14日龄进行第一次免疫，可采用点眼、滴鼻、肌内注射或饮水等方法；在30~35日龄时进行第二次免疫，以后每隔8~10周再加强免疫。免疫剂量详见使用说明书。